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mFluor Violet 450小麦胚芽凝集素(WGA)探针,可用于免疫荧光、流式细胞术

作者:西安百萤生物科技有限公司 暂无发布时间 (访问量:2677)

AAT Bioquest 生产的小麦胚芽凝集素(WGA)能与N-乙酰葡萄糖胺唾液酸结合,是目前研究多且有用的凝集素之一。小麦胚芽凝集素可用于标记细胞膜(如:活细胞固定细胞组织切片酵母革兰氏阳性细菌及真菌等 ),从而进行荧光成像和分析。也可用于免疫荧光(IF)、免疫组织化学(IHC)和流式细胞术(FC)。

图1.将HeLa 细胞用浓度为 10 µg/mL 的 mFluor™ Violet 450芽凝集素 (WGA) 探针染色 30 分钟。使用配备紫罗兰滤光片组的荧光显微镜获取的图像。

mFluor Violet 450小麦胚芽凝集素(WGA)探针优势:

1.应用广泛;

2.不受膜电位控制;

3.用于细胞膜表面的标记,有助于膜结构的成像

mFluor Violet 450小麦胚芽凝集素(WGA)探针参数

Ex(nm) 406
Em(nm) 445
溶    剂 Water
存储条件 在-15℃以下保存,避光防潮

     

mFluor Violet 450小麦胚芽凝集素(WGA)探针适用仪器

荧光显微镜

Ex  406nm
Em 445nm
推荐孔板 黑色透明底板

       

 mFluor Violet 450小麦胚芽凝集素(WGA)探针实验方案

样品分析方案

溶液配制

储备溶液配制 

mFluor 450 小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物储备液 (200X)

将 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中,制成 2 mg/mL 的储备溶液。

注意:重新配制的缀合物溶液可在 2-8 °C 下短期储存,或在 -20 °C 下长期储存。

 

工作溶液配制 

mFluor 450 小麦胚芽凝集素 (WGA) 缀合物​​工作溶液 (1X)

将 5 μL 200X WGA 储备溶液添加到 1 mL HHBS 缓冲液中。

注意:不同细胞系的优化染色浓度可能不同。 活细胞的推荐起始浓度为 5-10 µg/mL。

 

操作方案

活细胞染色

1. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

2. 添加 100 µL mFluor 450-WGA 工作溶液。

3. 将细胞与 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分钟。

4. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

5. 使用 Ex/Em = 406/445 nm在荧光显微镜上成像细胞。

 

固定细胞染色

1. 用含4%甲醛的PBS溶液固定细胞。

注意:对于固定细胞膜染色,建议在没有透化步骤的情况下进行染色。固定后透化步骤会导致细胞内区室染色,如高尔基体和内质网 (ER) 结构染色。

2. 添加 100 µL mFluor 450-WGA 工作溶液。

3. 在室温下,用 WGA 工作溶液孵育细胞 10-30 分钟。

4. 用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

5. 使用Ex/Em = 406/445 nm在荧光显微镜上成像细胞。

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